تصاب أشجار الحمضيات بعدة أمراض فيروسية ومن أخطرها فيروس التدهور السريع (التراستيزا) Tristeza Virus الذي يفتك بآلاف الأشجار في عدة مناطق في العالم وخاصة الأشجار المطعومة على أصل نارنج. وهذه الأمراض الفيروسية تفتك بالأشجار وتؤدي إلى ضعف عام وموت مفاجئ أحيانًا وبالتالي تدهور الاقتصاد الزراعي.

ولعل من الأسباب التي أدت إلى زيادة انتشار هذا الفيروس سهولة انتقاله حشريًا بواسطة حشرات المن Myzus citrcidous ونقله ميكانيكا عن طريق مقصات التقليم والأدوات الزراعية ونقله أيضًا عن طريق التطعيم وذلك بتطعيم الأشتال بطعوم من أمهات مصابة بالفيروس أصلاً. إلى جانب ذلك انتشرت ظاهرة عدم التوافق بين الأصل والطعم Incompatability والتي أدت إلى موت كثير من الأشجار بعد مضي 7 – 10 سنوات من عمرها.
وتفاديًا لذلك فقد استخدمت طريقة زراعة الأنسجة Tissue Cluture وذلك لإنتاج شتلات حمضيات خالية من الأمراض الفيروسية وخاصة (التراستيزا) وبكميات كبيرة وكذلك لتفادي ظاهرة عدم التوافق بين الأصل والطعم وذلك للحفاظ على الثروة الزراعية لأشجار الحمضيات داخل الدولة مع مراعاة الحفاظ على هذه الشتلات من الإصابات ومراعاة رشها دوريًا ضد حشرة المن الناقلة للفيروس.

تعتمد تقنية إنتاج شتلات حمضيات خالية من الأمراض الفيروسية على ثلاث مراحل أساسية وهي:

 المرحلة الأولى:

إنبات الأصل:
استخدمت بذور النارنج وتم زراعتها بعد تقشيرها وتعقيمها بمحلول هيدروكسيد الصوديوم في وسط غذائي صلب (بيئة مغذية) تحتوي على الأملاح المعدنية والفيتامينات بالإضافة إلى الهرمونات التي تساعد على سرعة الإنبات والاستطالة. ثم تحضين الأنابيب المحتوية على الوسط الغذائي وبذور النارنج بحاضنة ذات درجات حرارة ورطوبة منتظمة وبدون إضاءة لمدة (15 – 20) يوم حتى تم الحصول على نباتات مستقيمة طولها حوالي 10 سم (أصل).

 المرحلة الثانية:

التطعيم القمي الدقيق: Micrograftiong
تم الحصول على براعم قمية لأصناف مختلفة من الحمضيات من أمهات خالية من الأمراض الفيروسية وخاصة (التراستيزا) بعد فحصها سيرولوجيًا بطريقة الأليزا وأجريت عمليات التعقيم للتأكد من خلوها من الملوثات الخارجية وفي كابينة العزل (Laminar flow) تم استئصال المرسيتم القمي مجهريًا (الطعم) وأجريت عملية تطعيم بين الأصل بعد إزالة ثلثي الجذر وثلث الساق وبين الطعم وذلك على شكل حرف T. وبعد تثبيت المرسيتم القمي (الطعم) داخل الأصل بشكل حرف T مقلوبة تم زراعة النموذج في أنابيب اختبار تحتوي على أوساط مغذية خاصة وأجري تحضين للأنابيب داخل غرفة النمو على درجة حرارة 28 – 32 ْم مع توفر إضاءة لمدة 16 ساعة ضوئية يوميًا وذلك لمدة 30 يوم تقريبًا لحين التئام الأصل والطعم والحصول على نبات داخل الأنبوب.

المرحلة الثالثة:

التطعيم القمي: Shoot Tip Grafting
أجريت هذه الخطوة داخل البيوت المحمية المنزرعة بشتلات لعدة أصناف من الحمضيات والتي تم استخدامها كأصول للتطعيم. نقلت النباتات النامية في الأنابيب والمتحصل عليها من الخطوة السابقة وتم فصل البراعم النامية وأجريت عملية تطعيم لهذه البراعم على الأصول المختلفة لشتلات الحمضيات مع مراعاة تطابق الأصل مع الطعم لتلافي ظاهرة عدم التطابق. أجريت عملية التطعيم في مناطق مختلفة على الأصل وذلك لضمان نجاح العملية وتم تكييس الشتلات المطعومة بأكياس من البلاستيك بهدف رفع درجة الرطوبة ومنع جفاف منطقة التطعيم وبعد التأكد من نجاح عملية التطعيم تم إزالة الكيس البلاستيكي للسماح للنباتات الناتجة باستمرارية النمو حتى حجم معين وتم نقلها للحقول المستديمة مع مراعاتها من حيث التسميد والري ومنع الإصابة الفيروسية الجديدة. وبذلك تم الحصول على شتلات حمضيات خالية من الأمراض الفيروسية مع مراعاة توافق الأصل والطعم.

المصدر:

• مجلة شمس العدد 91 يوليو - أغسطس 2008 
• م. ز/ وائل بكري